紫外可見分光光度計(jì)是精密分析儀器,其操作規(guī)范性直接影響測(cè)量精度、儀器壽命及實(shí)驗(yàn)安全。以下從開機(jī)前、開機(jī)預(yù)熱、測(cè)量過(guò)程、關(guān)機(jī)后、日常維護(hù)五個(gè)核心維度,梳理詳細(xì)注意事項(xiàng):
一、開機(jī)前準(zhǔn)備:排除環(huán)境與硬件隱患
環(huán)境檢查
溫度:需控制在 15~30℃(最佳 20~25℃),避免陽(yáng)光直射、空調(diào)直吹或靠近熱源(如電爐),溫度劇烈波動(dòng)會(huì)導(dǎo)致基線漂移。
濕度:相對(duì)濕度≤ 75%,濕度過(guò)高易導(dǎo)致光學(xué)部件發(fā)霉、電路短路,建議潮濕環(huán)境搭配除濕機(jī)使用。
清潔:儀器周圍無(wú)粉塵、腐蝕性氣體(如酸堿揮發(fā)物),樣品室需提前擦拭干凈(用無(wú)塵布蘸乙醇輕擦)。
電源與配件檢查
電源:確認(rèn)電壓為 220V±10%(部分進(jìn)口儀器需 110V,需提前核對(duì)),插頭接觸良好,接地可靠(避免漏電或電磁干擾)。
光源:檢查氘燈(紫外區(qū),190~400nm)、鎢燈(可見區(qū),400~1100nm)是否過(guò)期(一般氘燈壽命 1000~2000h,鎢燈 2000~3000h),外觀無(wú)發(fā)黑、破裂。
比色皿:
材質(zhì)區(qū)分:紫外區(qū)(≤400nm)必須用石英比色皿(玻璃會(huì)吸收紫外光),可見區(qū)(≥400nm)可選用玻璃或石英比色皿,嚴(yán)禁混用。
狀態(tài)檢查:比色皿無(wú)裂痕、透光面(兩面光滑面)無(wú)劃痕、污漬,磨砂面(手握面)無(wú)破損。
二、開機(jī)與預(yù)熱:保障儀器穩(wěn)定初始化
開機(jī)順序(嚴(yán)格遵循)
先開啟 儀器主機(jī)電源,等待儀器自檢(屏幕顯示 “Pass" 或無(wú)報(bào)錯(cuò));
自檢通過(guò)后,打開配套軟件(如 Shimadzu UVprobe、Thermo Insight),選擇對(duì)應(yīng)的光源(紫外 / 可見);
嚴(yán)禁先開軟件再開主機(jī),避免軟件無(wú)法識(shí)別儀器導(dǎo)致通訊故障。
預(yù)熱要求
光源預(yù)熱:氘燈需預(yù)熱 20~30 分鐘,鎢燈需預(yù)熱 10~15 分鐘,確保光源強(qiáng)度穩(wěn)定(預(yù)熱不足會(huì)導(dǎo)致吸光度數(shù)據(jù)波動(dòng))。
整機(jī)穩(wěn)定:部分高精度儀器需整機(jī)預(yù)熱 30 分鐘以上(具體以說(shuō)明書為準(zhǔn)),預(yù)熱期間不可打開樣品室蓋子,避免影響基線穩(wěn)定性。
三、測(cè)量過(guò)程:核心操作規(guī)范(影響數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性)
比色皿使用:避免 “隱形誤差"
拿取方式:僅握磨砂面,嚴(yán)禁觸碰透光面(指紋、油脂會(huì)吸收光,導(dǎo)致吸光度偏高),若不慎觸碰,需用無(wú)塵紙蘸乙醇輕輕擦拭,再用純水擦凈并晾干。
清洗與潤(rùn)洗:
測(cè)量前:比色皿需用純水清洗 3 次,再用待測(cè)樣品溶液潤(rùn)洗 2~3 次(避免樣品濃度被殘留水稀釋,導(dǎo)致數(shù)據(jù)偏低)。
測(cè)量后:若樣品為酸、堿、有機(jī)溶劑(如甲醇、乙醇),需立即用對(duì)應(yīng)溶劑沖洗(酸 / 堿用大量水沖,有機(jī)溶劑用乙醇沖),再用純水洗凈,倒置晾干(避免殘留腐蝕比色皿)。
裝液要求:液體體積需占比色皿 2/3~3/4(過(guò)少會(huì)導(dǎo)致光路未被覆蓋,過(guò)多易溢出污染樣品室),裝液后需輕輕倒置搖勻(避免氣泡),若有氣泡需用針頭挑破或靜置至氣泡消失(氣泡會(huì)散射光,導(dǎo)致吸光度異常偏高)。
空白校正:消除背景干擾
空白溶液選擇:需與樣品 “基體一致"(如樣品為水溶液 + 試劑,空白則為純水 + 同等濃度試劑),不可直接用純水做空白(會(huì)忽略試劑本身的吸光度)。
校正操作:將空白比色皿放入樣品室的 “參比位"(一般為第一個(gè)卡槽),樣品比色皿放入 “測(cè)量位",點(diǎn)擊軟件 “空白校正" 或 “基線校正",待校正完成(吸光度顯示 0.0000±0.0005)后再開始測(cè)量。
注意:每更換一次波長(zhǎng),需重新進(jìn)行空白校正(不同波長(zhǎng)下,空白的吸光度可能不同)。
樣品測(cè)量:控制濃度與操作細(xì)節(jié)
濃度范圍:樣品吸光度需控制在 0.2~0.8(部分儀器 0.1~1.0),此范圍線性關(guān)系最佳;若吸光度>1.0,需用溶劑稀釋(記錄稀釋倍數(shù),最終結(jié)果 = 測(cè)量值 × 稀釋倍數(shù));若吸光度<0.2,需濃縮樣品(避免誤差過(guò)大)。
光路對(duì)齊:比色皿放入樣品室時(shí),需確保透光面與光路方向一致(部分比色皿有箭頭標(biāo)識(shí)),蓋緊樣品室蓋子(開蓋會(huì)導(dǎo)致雜光進(jìn)入,數(shù)據(jù)跳變)。
測(cè)量順序:建議從低濃度到高濃度測(cè)量(避免高濃度樣品殘留污染低濃度樣品,若污染需用空白溶液沖洗比色皿 3 次后再測(cè))。
數(shù)據(jù)記錄:避免遺漏關(guān)鍵信息
記錄內(nèi)容:波長(zhǎng)、空白溶液組成、樣品稀釋倍數(shù)、吸光度值(保留 4 位有效數(shù)字)、測(cè)量時(shí)間、儀器型號(hào);
數(shù)據(jù)驗(yàn)證:同一樣品平行測(cè)量 3 次,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)需<2%(精密實(shí)驗(yàn)<1%),若 RSD 過(guò)大,需檢查比色皿是否潔凈、樣品是否均勻。
四、關(guān)機(jī)后操作:保護(hù)儀器與環(huán)境
關(guān)機(jī)順序(反向開機(jī))
先關(guān)閉軟件(保存數(shù)據(jù)后正常退出,避免強(qiáng)制關(guān)閉導(dǎo)致數(shù)據(jù)丟失);
等待軟件關(guān)閉后,關(guān)閉儀器主機(jī)電源;
最后拔掉插頭(長(zhǎng)期不用時(shí)),若短期使用(如次日再用),可保留插頭,但需關(guān)閉主機(jī)電源。
樣品室與比色皿清理
樣品室:用無(wú)塵布蘸純水擦拭殘留液體(若樣品為腐蝕性物質(zhì),需用對(duì)應(yīng)中和劑擦拭后再用純水擦凈),保持干燥;
比色皿:洗凈后倒置在比色皿架上晾干,嚴(yán)禁用濾紙擦拭透光面(會(huì)產(chǎn)生劃痕),長(zhǎng)期不用時(shí)需放入干燥器(加硅膠干燥劑)。
周邊環(huán)境整理
清理實(shí)驗(yàn)臺(tái),避免樣品、試劑靠近儀器;
記錄儀器使用日志(如開機(jī)時(shí)間、預(yù)熱時(shí)長(zhǎng)、測(cè)量樣品數(shù)、是否出現(xiàn)故障),便于后續(xù)維護(hù)排查。
五、日常維護(hù)與校準(zhǔn):延長(zhǎng)儀器壽命
定期維護(hù)(按說(shuō)明書周期)
光源更換:氘燈、鎢燈達(dá)到壽命后需及時(shí)更換(燈能量不足會(huì)導(dǎo)致基線噪聲增大),更換時(shí)需斷電操作,避免觸碰燈的石英外殼(指紋會(huì)影響壽命);
光學(xué)部件清潔:每 3~6 個(gè)月,用洗耳球吹去單色器、檢測(cè)器表面的粉塵(嚴(yán)禁拆開儀器外殼,需由專業(yè)人員操作);
比色皿維護(hù):定期檢查透光面,若有劃痕需更換(劃痕會(huì)導(dǎo)致吸光度偏高),避免用硬物(如試管刷)清洗。
定期校準(zhǔn)(確保精度)
波長(zhǎng)校準(zhǔn):每 6~12 個(gè)月用標(biāo)準(zhǔn)波長(zhǎng)溶液(如重鉻酸鉀溶液、鈥玻璃濾光片)校準(zhǔn),若波長(zhǎng)偏差>2nm,需由專業(yè)人員調(diào)整;
吸光度校準(zhǔn):用標(biāo)準(zhǔn)吸光度溶液(如高錳酸鉀溶液、硫酸銅溶液)校準(zhǔn),確保測(cè)量值與標(biāo)準(zhǔn)值的誤差<1%;
基線平直度檢查:在空白校正后,掃描全波長(zhǎng)(190~1100nm),基線漂移需<0.001A/h(200nm 處)、<0.0005A/h(500nm 處),若漂移過(guò)大,需檢查光源或光學(xué)部件。
特殊情況處理
儀器報(bào)錯(cuò):若顯示 “光源錯(cuò)誤"“通訊故障",先斷電重啟,若仍報(bào)錯(cuò),聯(lián)系廠家售后(嚴(yán)禁私自拆修);
樣品溢出:若樣品灑入樣品室,立即斷電,用無(wú)塵布吸干液體,再用對(duì)應(yīng)溶劑(如乙醇、純水)擦拭,晾干后再開機(jī)(避免電路短路);
長(zhǎng)期閑置:每月開機(jī)預(yù)熱 1 次(30 分鐘),防止光學(xué)部件發(fā)霉、電池虧電(部分儀器有內(nèi)置電池)。